PDF: Aulas Replicação e Reparo

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Replicação de DNA Replicação de DNA

DuplaDupla--hélice composta hélice composta de de nucleotídeos ligados nucleotídeos ligados entre si entre si e e cujascujasbases bases nitrogenadas nitrogenadas de de uma uma hélice fazemhélice fazempontes de pontes de hidrogênio hidrogênio com bases com bases nitrogenadas nitrogenadas de de outra outra hélicehélice, , numa direção numa direção antianti --paralelaparalela . .

Replicaçãodo DNA

Proceso que precede a divisProceso que precede a divisãão celular e atravo celular e atravéés do qual s do qual sãão o geradas cgeradas cóópias pias ididêênticasnticasdas moldas molééculas de DNA presentes culas de DNA presentes na cna céélulalula--mmããe, a seguir herdadas pelas duas ce, a seguir herdadas pelas duas céélulaslulas--filhas filhas

Duplicação dos cromossomos

Divisão celular

Separação dos cromossomos

Cada vez que uma Cada vez que uma célula divide a célula divide a informação informação genética precisa genética precisa ser transmitida às ser transmitida às células filhas células filhas formação de formação de gametas para gametas para transmissão da transmissão da informação informação para a próxima para a próxima geração geração

Ciclo Celular Ciclo Celular

Antes de iniciar a Antes de iniciar a condensação dos condensação dos cromossomos o DNA cromossomos o DNA necessita ser duplicado : necessita ser duplicado :

é a fase S é a fase S

ExperimentoExperimentode de MeselsonMeselson& Stahl, 1958 & Stahl, 1958

A pergunta A pergunta

Cultivo de bactérias Cultivo de bactérias em meio contendo em meio contendo

Cl, Cl,

IsótopoIsótopopesado de N pesado de N

Transferência para Transferência para meio contendo meio contendo

Cl Cl

Extração e purificação do DNA Extração e purificação do DNA seguida de centrifugação em seguida de centrifugação em gradiente de gradiente de CsCl CsCl

Molécula parental

Primeirageraçãode moléculas “filhas”

Segundageraçãode moléculas “filhas”

ExperimentoExperimentode de MeselsonMeselson& Stahl, 1958 & Stahl, 1958

A resposta A resposta

Replicação Replicação do DNA do DNA --características características

••Síntese de DNA é Síntese de DNA é semisemi --conservativa conservativa

Fita 1 parental

Fita 2 parental

Fita 1 parental Fita 2 parental Fita 2

“filha”

Fita 1 “filha”

ReplicaçãoReplicação do do cromossomocromossomo bacteriano bacteriano

ExperimentoExperimentode J. Cairns, 1963 de J. Cairns, 1963

Cultivo de bactérias Cultivo de bactérias em meio contendo em meio contendo

Trítio ( Trítio (

H),H), isótopo isótopo radioativo de H radioativo de H

Isolamento do DNA, Isolamento do DNA, espalhamento em espalhamento em emulsão fotográfica emulsão fotográfica

Observação em Observação em microscópio eletrônico microscópio eletrônico

Replicação Replicação do DNA do DNA --características características

••Começa numa Começa numa origem de origem de replicação (replicação (OriOri) e é ) e é bidirecional bidirecional

O genoma bacteriano circular constitui um O genoma bacteriano circular constitui um únicoúnicoreplicon replicon

••A velocidade da forquilha de replicação A velocidade da forquilha de replicação bacteriana é bacteriana é 50.0 50.0 pb/min pb/min

Um única origem de replicação em

Um única origem de replicação em E.E.coli coli

((OriCOriC, 245 pb) , 245 pb)

Forquilha de replicação Forquilha de replicação

Região do DNA onde ocorre a transição do DNA parental fita duplaRegião do DNA onde ocorre a transição do DNA parental fita duplapara as para as novas fitas filhas duplas novas fitas filhas duplas

O genoma eucariótico possui O genoma eucariótico possui váriosváriosreplicons replicons

A velocidade da forquilha de replicação eucariótica é A velocidade da forquilha de replicação eucariótica é 2.0 2.0 pb/min pb/min

••Os Os repliconsreplicons eucarióticos tem 40 eucarióticos tem 40-- 100 kb e são iniciados em tempos diferentes 100 kb e são iniciados em tempos diferentes

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