Roteiro de RCPtns

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ROTEIRO DE AULA PRÁTICA - REAÇÕES CORADAS DE PROTEÍNAS

 

 

FUNDAMENTO: As reações coradas são devidas à presença na molécula protéica de determinados resíduos de aminoácidos (Radicais R) e devido à presença de ligações peptídicas.

 

Empregar na execução da prática, solução a 5% de ovoalbumina, gelatina e peptona para todas as reações e observar as colorações desenvolvidas.

 

  1. REAÇÃO XANTOPRPOTEICA – Aminoácidos responsáveis: Tir; Fen; Trp

 

Técnica: Em um tudo de ensaio colocar:

 

  • 1,5mL de solução protéica a 5%

  • 0,5mL de HNO3 concentrado

  • Aquecer cuidadosamente até a fervura por 1 minuto

  • Observar a cor

  • Esfriar e adicionar gota NaOH 1:1 até alcalinizar o meio

  • Observar a mudança de cor

 

  1. REAÇÃO DE HOPKINS COLE – Aminoácido responsável: Trp

 

Técnica: Em um tubo de ensaio colocar:

 

  • 1mL de solução protéica a 5%

  • 1mL de ácido glioxílico ou ácido acético de fermentação

  • Misturar bem e adicionar cuidadosamente pela parede, com o tubo inclinado, 1mL de H2SO4 concentrado (Técnica do Anel)

  • Observar a cor do anel

 

  1. REAÇÃO DE SAKAGUSHI: Aminoácido responsável: Arg

 

Técnica: Em um tubo de ensaio colocar:

 

  • 1,5mL de solução protéica a 5%

  • 0,5mL de solução de NaOH a 5%

  • 2 gotas de solução de α-Naftol a 1% em álcool etílico

  • 2 gotas de hipoclorito de sódio aproximadamente 10%

  • Agitar bem

  • Observar a cor

 

 

  1. REAÇÃO DE PAULY – Aminoácidos responsáveis: Tir; His

 

Técnica: Em um tubo de ensaio colocar:

 

  • 1mL de ácido sulfanílico a 1% em HCl 10%

  • 1mL de nitrito de sódio a 5%

  • Misturar bem e depois de 1 minuto adicionar 1mL de solução protéica a 5%

  • Misturar bem

  • Colocar solução diluída de Na2COaté alcanilizar o meio

  • Observar a mudança de cor

 

  1. REAÇÃO DE BIURETO – Grupamentos responsáveis: - CONH2 com outros grupos como: - CONH2; CSNH2; CRNH2, etc

 

Técnica: Em um tubo de ensaio colocar:

 

  • 1,5mL da solução protéica a 5%

  • 0,5mL de solução de NaOH 2,5N

  • 2 gotas de CuSO4 a 1%

  • Observar a cor

 

 

 

Anotar o que você observou na execução das reações:

 

 

 

 

Xantoproteica

Hopkins-Cole

 

Sakagushi

 

Pauly

 

Biureto

 

Ovoalbumina

 

 + Amarelo Ouro

+ Anel Violeta

+ Alaranjado

+ Laranja

+ Violeta

 

Gelatina

 

+ Amarelo Claro 

Não forma Anel

+ Castanho

+ Castanho Alaranjado

+ Violeta

 

Peptona

 

+ Amarelo Claro

+ Anel Violeta

+ Alaranjado

+ Avermelhado

+ Violeta

 

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