anvisa meios de cultura

anvisa meios de cultura

(Parte 4 de 19)

Os sais de bile contidos no meio de tetrationato inibem microrganismos Gram positivos e a adição da solução de iodo inibe a flora intestinal normal de espécies fecais.

UTILIDADE Meio de enriquecimento para Salmonella spp.

Meio comercial: Caldo Tetrationato. Solução de Iodo para tetrationato: para ser adicionado no caldo antes de semeada a amostra de fezes.

Iodo metálico6,0 g
Iodeto de potássio5,0 g
Água destilada20,0 ml

Caldo tetrationato Pesar e hidratar o meio segundo instruções do fabricante;

Aquecer até ferver;

Distribuir 10 ml em tubos estéreis com tampa de rosca;

Solução de iodeto de potássio

Macerar o iodeto de potássio e o iodo em um graal; Adicionar água aos poucos até dissolver completamente;

Colocar em frasco âmbar.

Mod IV - 10

Crescimento: Preparar uma suspensão de Salmonella typhimurium ATCC 14028 e uma cepa de Escherichia coli

ATCC 25922 na escala 0,5 de Mac Farland; Semear 0,01 ml da suspensão em uma placa de S;

Se houver crescimento de Salmonella e inibição de Escherichia coli, liberar o lote para uso.

Adicionar 0,2 ml da solução de iodo no tubo; Inocular 1a 3 g da amostra de fezes e homogeneizar vigorosamente;

Incubar a 35 ±1°C por 12 a 18 horas.

Cor original do meio: límpido com precipitado branco. O crescimento é indicado pela turbidez do meio.

Após incubação, semear 3 a 4 alçadas da amostra em uma placa de S e/ou Mac Conkey.

Tetrationato: Conservar de 4 a 8°C por até 4 meses. Solução de iodo: Conservar em frasco âmbar a temperatura ambiente por até 12 meses.

Positivo: Neisseria gonorrhoeae 43069 e Neisseria meningitidis 13090. Negativo: Staphylococcus aureus ATCC 25923.

CONSERVAÇÃO E VALIDADE Conservar embalado de 4 a 8°C por até 3 meses.

Usar a técnica de semeadura por esgotamento;

Incubar em CO2 e umidade (jarra com vela acesa e um chumaço de algodão embebido em água); Incubação por 48 horas.

Cor original do meio: castanho escuro (chocolate). Colônias pequenas com pigmento creme: sugestivo de Neisseria gonorrhoeae e Neisseria meningitidis.

Fazer esfregaço de todas as colônias suspeitas e corar pela técnica de Gram, para confirmar se trata-se ou não de Neisseria (diplococos Gram negativos reniformes).

Confirmando a morfologia pelo Gram, seguir identificação com testes de oxidase e provas de fermentação.

Antes de semear o material biológico aquecer o meio de cultura em estufa à 35ºC, pois temperaturas baixas podem inibir o crescimento de Neisserias;

Não usar meio, suplementos e sangue vencidos;

Se não for incubado em CO2 e não houver crescimento, pode ser um resultado falso - negativo, pois as Neisserias necessitam de atmosfera com o CO2 para o crescimento;

Se não houver crescimento, incubar até 5 dias.

Mod IV - 1

O meio de Tioglicolato dá suporte para o crescimento de vários microrganismos. O potencial de oxidação e redução baixo do meio neutraliza efeitos antibacterianos das espécies preservadas com mercúrio.

A resazurina e o azul de metileno são indicadores da posição de oxidação de aeróbios e a dextrose incluída na fórmula é para os microrganismos que tem crescimento vigoroso na presença do carboidrato.

Usado para o cultivo de microrganismos aeróbios, microaerófilos e anaeróbios. Usado para controle de esterilidade bacteriana de diversos materiais.

FÓRMULA / PRODUTO Meio comercial: Tioglicolato caldo com indicador

Pesar e hidratar o meio conforme instruções do fabricante; Aquecer em bico de Bunsen, até dissolver completamente;

Distribuir 5 ml por tubo;

Esterilizar em autoclave.

CONTROLE DE QUALIDADE Crescimento bom a excelente: Bacillus subtilis ATCC 63, Streptococcus pyogenes ATCC 19615.

Temperatura ambiente: 3 meses. Entre 4 a 8ºC: 6 meses.

Com auxílio da alça bacteriológica, inocular o material biológico introduzindo a alça até a metade do tubo; Retirar a alça sem agitar o tubo;

Incubar à 35 =/- 1ºC por 24 horas.

Cor original: amarelo claro. Presença de crescimento: turvação do meio.

Ausência de crescimento: meio permanece inalterado.

Crescimento de microrganismos anaeróbios: crescimento na profundidade do meio.

Crescimento de microrganismos aeróbios: crescimento na superfície do meio.

Não usar o meio quando estiver com cor rosa ou esverdeado na superfície, pois indica a presença de oxigênio no meio.

Recomenda-se o uso do meio recém preparado, porém, se não houver a presença de oxigênio, pode-se usar um período maior.

Não usar meios que estejam turvos.

Não utilizar o meio quando o indicador atingir a metade do volume do meio.

Mod IV - 12

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