anvisa meios de cultura

anvisa meios de cultura

(Parte 5 de 19)

As substâncias redutoras tioglicolato, cisteína e sulfito de sódio produzem uma anaerobiose suficiente para microrganismos anaeróbios exigentes.

UTILIDADE Usado para o cultivo de microrganismos anaeróbios.

FÓRMULA / PRODUTO Meio comercial: Tioglicolato caldo sem indicador.

Pesar e hidratar o meio conforme instruções do fabricante; Aquecer em bico de Bunsen, até dissolver completamente;

Distribuir 5 ml por tubo;

Esterilizar em autoclave.

CONTROLE DE QUALIDADE Crescimento bom a excelente: Clostridium perfringens ATCC 10543.

CONSERVAÇÃO E VALIDADE Temperatura ambiente: 18 meses.

Com auxílio da alça bacteriológica, inocular o material biológico introduzindo a alça até o fundo do tubo; Retirar a alça sem agitar o tubo;

Incubar à 35 =/- 1ºC em jarra com gerador de anaerobiose durante 48 horas.

Cor original: amarelo claro. Presença de crescimento: turvação do meio.

Ausência de crescimento: meio permanece inalterado.

Não usar meios que estejam turvos. Se necessário, incubar um período superior à 48 horas.

e estafilococos

O cristal violeta inibe o crescimento de microrganismos Gram positivos especialmente enterococos

A concentração de sais de bile é relativamente baixa em comparação com outros meios, por isso não é tão seletivo para Gram negativos como, por exemplo, o ágar S.

Isolar bacilos Gram negativos (enterobactérias e não fermentadores) e verificar a fermentação ou não da lactose.

Mod IV - 13

FÓRMULA /PRODUTO Meio comercial: Ágar MacConkey.

Pesar e hidratar o meio conforme instruções do fabricante; Aquecer sob agitação até fundir o ágar completamente;

Esterilizar em autoclave;

Resfriar até 50°C e distribuir 20 a 25 ml em placas de Petri 90 m estéreis;

Deixar em temperatura ambiente até resfriar;

Embalar as placas com plástico PVC transparente e guardar em geladeira de 4 a 8°C.

Positivo: Proteus mirabilis ATCC 12453 (não fermentador de lactose). Positivo: Escherichia coli ATCC 25922 (fermentador de lactose).

Negativo: Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Inocular as placas e incubar por 18 a 24 horas; Se negativo após 24 horas, reincubar por mais 24 horas.

Cor original do meio: rosa avermelhado. Crescimento de bacilos Gram negativos.

Colônias cor de rosa: fermentadoras de lactose.

Colônias incolores: não fermentadoras de lactose.

Não há crescimento de cocos Gram positivos.

CONSERVAÇÃO E VALIDADE Conservar as placas embaladas de 4 a 8°C por até 3 meses.

O meio de Ágar sangue, usando uma base rica como abaixo descrita, oferece ótimas condições de crescimento a maioria dos microrganismos. A conservação dos eritrócitos íntegros favorecem a formação de halos de hemólise nítidos, úteis para a diferenciação de Streptococcus spp. e Staphylococcus spp.

Usado para o isolamento de microrganismos não fastidiosos. Verificação de hemólise dos Streptococcus spp. e Staphylococcus spp.

Usado na prova de satelitismo (para identificação presuntiva de Haemophilus spp.).

Meio comercial: Blood Ágar Base, Columbia Ágar Base, BHI Ágar, Mueller Hinton Ágar; Sangue desfibrinado de carneiro ou coelho:

5 ml para cada 100 ml de meio base. pH: 6,8 +/- 0,2

PROCEDIMENTOS Pesar e hidratar o meio conforme instruções do fabricante;

Mod IV - 14

Esterilizar em autoclave; Esfriar a base à +/- 50ºC;

Adicionar 5 ml de sangue desfibrinado de carneiro para cada 100 ml de base;

Homogeneizar delicadamente para não formar bolhas;

Distribuir em placas de Petri de 90 m de diâmetro.

Hemólise beta hemolítica: Streptococcus pyogenes ATCC 19615 ou Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Hemólise alfa hemolítica: Streptococcus do grupo viridans ou Streptococcus pneumoniae ATCC 6305.

Hemólise gama (sem hemólise): Enterococcus faecalis ATCC 29212 ou Staphylococcus epidermidis ATCC 12228.

CONSERVAÇÃO E VALIDADE Conservar de 4 a 10°C por 4 meses.

Estriar a superfície do meio, usando a técnica de semeadura para isolamento; No final da semeadura, picar o meio com a alça para verificar hemólise em profundidade;

Incubar à 35ºC 24 horas.

Cor original do meio: vermelho. Beta hemólise: presença de halo transparente ao redor das colônias semeadas (lise total dos eritrócitos).

Alfa hemólise: presença de halo esverdeado ao redor das colônias semeadas (lise parcial dos eritrócitos).

(Parte 5 de 19)

Comentários