Solução tampão e material biológico

Solução tampão e material biológico

UNIVERSIDADE FEDERAL DE VIÇOSA DEPARTAMENTO DE BIOLOGIA GERAL BIO-611 LABORATÓRIO DE BIOLOGIA CELULAR

Míriam Goldfarb Matrícula: 68612

Viçosa, Outubro, 2010

Tampões: são substâncias que em solução aquosa dão a estas soluções a propriedade de resistir as variações do seu pH quando às mesmas são adicionadas em quantidades relativamente pequenas de ácidos (H + ) ou base (OH - )

Sistema tampão: ácido fraco e base conjugada

Importância:processos biológicos são dependentes do pH, evitar variações na velocidade da reação

Lehninger (2007) e Santos (2003)

Resistência

Tampão efetivo a) pH igual ao pK b) Espécies ácidas e básicas são iguais c) pKa: característica de dissociação da amostra Lehninger (2007)

Lehninger (2007)

Reação química Íons hidrogênio (H + ) ou Hidroxila (OH-)

Espécies básicas e ácidas presentes na amostra

Ácido fraco e base fraca Fiorucci et al. (2001) e Lehninger (2007)

Ação tamponante: Henderson-Hesselbalch

pH = pKa + log[receptor de prótons] (base)

[ doador de prótons] (ácido)

Lehninger (2007)

Primeira linha de defesa do organismo contra as variações do pH interno

Fosfatos e bicarbonatos

2-H+ + HPO4
 pH 6,4 a 7,4

Fosfato H2 PO4 Fiorucci et al. (2001) e Lehninger (2007)

H2 CO3H+ + HCO3

Bicarbontatos: plasma sanguíneo

=[H+ ] [ HCO3 -]

K1 [H2 CO3 ]

 Concentração de CO2 : acidose e alcalose

Lehninger (2007)

TAMPÕES BIOLÓGICOS Enzimas

Lehninger (2007)

Extração de DNA a) Tris (Hidroximetil) b) RNase, protease, EDTA c) pH = 8,0

Eletroforese a) Evitar grandes oscilações do pH b) Proteínas nativas PAGE c) pI (Pontos isoelétricos)

Eletroforese pH = pI amostra sem movimento pH > pI caminha em direção ao pólo positivo pH < pI caminha em direção ao pólo negativo

Gel de poliacrilamida Gel de agarose

Uma solução tampão consiste de um par ácido fraco e base conjugada que resiste a variações no pH quando pequenas quantidades de ácidos e bases são adicionados.

Soluções tampões são importantes para manter o funcionamento dos sistemas biológicos, pois estes são sensíveis a variação do pH, tornando-os dependente do pH

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